مقایسه روش pcr با روش استاندارد mpn جهت تشخیص آلودگی باکتریایی در آب شرب

زمینه: تشخیص آلودگی میکروبی آب شرب به روش کشت علاوه بر هزینه بری، زمان بر بوده و بر حسب میزان آلودگی چند روز به طول می انجامد. این درحالی است که شهروندان در این زمان از آب مورد بررسی استفاده می نمایند. روش های ملکولی دارای حساسیت و سرعت عمل بالایی و زمان عملیاتی کمتری هستند. در این تحقیق روش multiplex pcr جهت ارزیابی سریع میکروبی آب از نظر کلی فرم، ecoli و تشخیص احتمالی باکتری های vbnc در آزمایشگاه باکتریولوژی شرکت آب و فاضلاب استان مرکزی و مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان در فاز عملیاتی اجرا گردید. مواد و روش ها: تشخیص سریع کلی فرم با کمک آمپلی فیکاسیون ژن های lacz و uida در واکنش multiplex pcr طراحی و اجرا گردید. 80 نمونه آب شرب شهر اراک شامل 41 نمونه چاه، 36 نمونه شبکه و 3 نمونه مخزن در این بررسی جمع آوری شده و با استفاده از آمپلی فیکاسیون ژن های lacz و uida مورد آزمایش multiplex pcr قرار گرفتند. همچنین آزمایش mpn به عنوان روشی استاندارد و جهت مقایسه یافته ها، روی تمامی نمونه ها انجام شد. روش های multiplex pcr و mpnروی باکتری استاندارد، باکتری های خالص شده از نمونه های mpn مثبت و نیز crm(certificated reference material، (سویه مرجع) انجام گردیدند. یافته ها: در نمونه های چاه، شبکه و مخزن، اکثر نمونه ها در هر دو روش نتایج مشابه را نشان دادند. نتیجه pcr روی باکتری استاندارد، کشت های خالص شده نمونه های mpn مثبت و crm نیز تأیید کننده روش pcr بود. پنج نمونه دارای pcr مثبت و نتیجه mpn منفی گزارش شدند. زمان کل عملیات pcr با تغییر فاکتورها به حدود یکصد و پنج دقیقه کاهش یافت. نتیجه گیری: روش multiplex pcr، امکان شناسایی همزمان باکتری های کلی فرم کل و اشرشیاکلی را در آب آشامیدنی فراهم نمود.